Построение герпетических карт

Первым шагом на пути построения герпетических карт является форми­рование групп сцепления генов, контролирующих различные наследствен­ные признаки, и исследование их взаимно\ого расположения в этих группах. На следующем этапе определяют соответс^твие между генетическими группами сцепления и цитогенетически идентифицируемыми хромосомами или их фрагментами. Цитогенетическую идентификацию хромосом проводят с использованием методов дифференциально) ои окраски. По мере появления все большего числа локализованщаых признаков эффективность построения генетических карт значительно возрастает, так как увеличивается число маркированных участков хромосом таким образом, появляется возможность комбинированного использоввания различных экспериментальных подходов для более подробного исследования этих участков.
Принципиально метод картирования  неизвестных генов, включает следующиие этапы:
♦  выяснение группы сцепления;
♦  поиск ближайших фланкирующих маркеров;
♦  определение физической областц-и (ДНК-последовательности), включающей искомый ген;
♦  клонирование набора фрагментов ЭДднК, перекрывающих исследуе­мую область;
♦  выделение из этого набора клонов, сходержащих транскрибируемые ДНК-последовательности, предподщожительно соответствующие гену или его фрагменту;
♦  анализ специфических мРНК и клонирование к ДНК-последовательности;
♦  секвенирование и идентификация  Самого гена [Wicking С, Wil­liamson R., 1991].
Рассмотрим подробнее эту схему. Подстроение карт сцепления осно­вано на изучении процессов расхождение и рекомбинации гомологичных хромосом в мейозе. Генетические пр:ОИзнаки, локализованные в разных хромосомах, не сцеплены друг с другом, т. е. передаются от родителей детям независимо, и частота их рекомбинации (Q) составляет 0,5. Это обусловлено случайным характером^ расхождения гомологичных хромосом в мейозе во время редукционцщого деления. Гены, локализо­ванные в одной хромосоме, рекомбинируют За счет кроссинговера, т. е. за счет обмена участками гомологичных хромосом в процессе их спаривания в мейозе  При этом порядок генов не нарушается, но в потомстве могут появиться новые комбинации родительских аллелей. Вероятность кроссинговера между двумя  генами зависит от расстояния между ними. Чем ближе гены расположении друг к другу, т. е. чем больше они сцеплены, тем эта вероятность меньше.