суббота

Сайты гиперчувствительные

Можно также отметить существование в геноме человека сайтов, гиперчувствительных к действию ДНКазы I и структурно отличающихся от основной массы хроматина. Присутствие таких сайтов показано для многих генов млекопитающих и, по-видимому, это необходимое, но не достаточное условие их экспрессии. Локализация гиперчувствительных сайтов может меняться в процессе развития и под действием гормонов. В некоторых случаях эти участки маркируют положение транскрипционных регуляторных элементов генома, действующих как в положительном, так и в отрицательном направлениях. В других случаях это области функционально активных генов, находящиеся в деспирализованном состоянии и имеющие однонитевую структуру. Именно такие однонитевые участки ДНК особенно высоко чувствительны к ДНКазе I. На этом их свойстве основан метод ник-трансляции in situ, позволяющий непосредственно на хромосомных препаратах визуализировать функционально активные районы хромосом. С этой целью хромосомные препараты обрабатывают ДНКазой I, после чего непосредственно на них с помощью ДНК-полимеразы проводят синтез ДНК в присутствии меченых нук-леотидов. При этом метка включается преимущественно в те участки хромосом, где находятся функционально активные гены [Verma R.S., BabuA., 1989].